地中海贫血基因治疗方法是什么

地中海贫血基因治疗方法是什么?这是备受关注的，因为地中海贫血所导致的危害是巨大的，其发病给患者带来了很大的伤害，为了有效抵制疾病带来的不必要麻烦发生，大家就得多咨询相关专家的建议，以帮助大家找到针对性的治疗方案，那么地中海贫血基因治疗方法是什么呢?

地中海贫血基因治疗方法是什么对β地贫的直接基因治疗最早可追溯至1980年，当时将正常的β珠蛋白基因直接注入2例β地贫患者的骨髓细胞，然后再回输患者体内，但经过一段时间的临床观察，未取得治疗效果。尽管有了初次的失败，但由于逆转录病毒运载的珠蛋白基因在mel细胞培养体系中的成功表达，以及转入的外源人β珠蛋白基因使β地贫小鼠的症状得到改善，这些都使人们对直接基因治疗充满了信心。但十几年来，由于外源基因在体细胞内表达水平低，达不到治疗效果，能表达外源基因的细胞数少，在跟踪观察中这些细胞还会减少,因此如何提高转化效率，提高病毒滴度和外源基因的表达，纯化可长期增殖、保持其数量的造血干细胞（ltra）,成为人们重新估价β地贫直接基因治疗的主要因素。

直接基因治疗的基本模式是：①构建运载目的基因的逆转录病毒载体;②前病毒的dna整合到包装细胞基因组中;③通过选择包装细胞得到有一次性感染能力的高滴度的病毒颗粒;④病毒颗粒感染靶细胞，经逆转录后前病毒dna整合到宿主基因组dna中，目的基因在相应的靶细胞中得到表达。载体的基本结构包括病毒表达、包装、整合的基本序列和目的基因及其启动子和调控序列，而病毒的gag，pol，env编码序列缺失，这样就阻止了野生型病毒的产生，而包装细胞则提供形成病毒颗粒所必需的由这些序列编码的蛋白质。在载体上加入的抗新霉素基因或编码特殊膜表面蛋白的基因，使得可以通过g418培养基或免疫学方法选择能产生高滴度载体的细胞系，然后以高滴度的、整合稳定的重组体感染mel细胞。然而感染的效率，整合过程中的重排，错误剪切等都影响了珠蛋白基因的表达水平。在动物实验中，外源基因很难长期存在并表达，说明感染的细胞中，真正长期增殖,并保持其数量的造血干细胞较少，外源基因的表达水平很难达到内源性鼠βmajor珠蛋白基因的5%。

红系特异增强系位点控制区（lcr）的发现和研究为提高珠蛋白基因的表达提供了新的可能性。lcr是由位于β珠蛋白基因簇上游的一系列对dnaseⅰ高敏感的位点组成（hypersensitivesites1～5，hs1～5），全长超过20kb。lcr具有两种互相独立的作用：增强子作用和位点非依赖作用。在动物试验中，lcr可大大增加外源珠蛋白的表达，并不受整合位点的影响，表达水平只与整合基因的拷贝数有关。除hs1外,其余hs位点均有增强子的作用，5个hs位点能协同增强基因表达的功能。hs2和hs3被认为是最有活性的片段，hs2和hs3上能保证其功能的最小核心部分分别是0.4kb的hindⅲ至xbaⅰ之间的片段和225bp的hphⅰ至fnu4hⅰ之间的片段，但各hs位点间的连接序列对于它们之间的协同作用是不可缺少的。β珠蛋白lcr这两种作用的作用机制都尚未清楚。在转基因鼠中，lcr调控元件中不同的hs位点赋予了基因不同的表达模式，hs3似乎与胚胎型ε珠蛋白基因表达相关，hs4与β珠蛋白基因表达相关。louis-guy等在将βlcr与lacz基因顺式连接的转基因鼠的试验中发现，lcr增强基因表达的作用并非如以前研究认为的那样通过二元机制（即有或无）的方式起作用，而是以一种渐变的作用方式增强基因表达,而其位点非依赖作用的实现则需要至少3个以上的hs位点及β珠蛋白基因簇附近的侧翼序列。lcr究竟是改变了染色体的结构而导致染色体特定部位的开放，还是封闭了整合位点周围基因的负性效应,这些问题仍在研究之中。但βlcr严重影响病毒重组体的滴度，导致缺失和重排。

有关地中海贫血基因治疗方法问题，大家一定要格外的关注和注意，毕竟谁都希望尽早的治疗疾病，拥有健康的体魄，享受快意人生，希望上述给出的地中海贫血基因治疗方法能够很好的帮助大家，另外提醒大家，想要取得好的治疗效果，大家还需结合自身的实际情况选择个性化的治疗方案。